無塵無菌室的檢驗流程方法

無菌室一個應用行業非常廣泛的基礎性配套產業,目前在電子信息、半導體、光電子、精密製造、醫藥衛生、生物工程、航天航空、汽車噴塗等眾多行業均有應用,並根據行業的精密與無塵要求,等級差別也較大。1.無菌室應設有無菌操作間和緩衝間,無菌操作間潔淨度應達到10000級,室內溫度保持在20-24℃,濕度保持在45-60%。超潔淨工作檯潔淨度應達到100級。2.無菌室應保持清潔,嚴禁堆放雜物,以防污染。3.嚴防一切滅菌器材和培養基污染,已污染者應停止使用。4.無菌室應備有工作濃度的消毒液,如5%的甲酚溶液,70%的酒精,0.1%的新潔爾滅溶液,等等。5.無菌室應定期用適宜的消毒液滅菌清潔,以保證無菌室的潔淨度符合要求。6.需要帶入無菌室使用的儀器,器械,平皿等一切物品,均應包紮嚴密,並應經過適宜的方法滅菌。7.工作人員進入無菌室前,必須用肥皂或消毒液洗手消毒,然後在緩衝間更換專用工作服,鞋,帽子,口罩和手套(或用70%的乙醇再次擦拭雙手),方可進入無菌室進行操作。 8.無菌室使用前必須打開無菌室的紫外燈輻照滅菌30分鐘以上,並且同時打開超淨台進行吹風。操作完畢,應及時清理無菌室,再用紫外燈輻照滅菌20分鐘。9.供試品在檢查前,應保持外包裝完整,不得開啟,以防污染。檢查前,用70%的酒精棉球消毒外表面。10.每次操作過程中,均應做陰性對照,以檢查無菌操作的可靠性。11.吸取菌液時,必須用吸耳球吸取,切勿直接用口接觸吸管。12.接種針每次使用前後,必須通過火焰灼燒滅菌,待冷卻後,方可接種培養物。13.帶有菌液的吸管,試管,培養皿等器皿應浸泡在盛有5%來蘇爾溶液的消毒桶內消毒,24小時後取出沖洗。14.如有菌液灑在桌上或地上,應立即用5%石碳酸溶液或3%的來蘇爾傾覆在被污染處至少30分鐘,再做處理。工作衣帽等受到菌液污染時,應立即脫去,高壓蒸汽滅菌後洗滌。15.凡帶有活菌的物品,必須經消毒後,才能在水龍頭下沖洗,嚴禁污染下。16.無菌室應每月檢查菌落數。在超淨工作檯開啟的狀態下,取內徑90mm的無菌培養皿若干,無菌操作分別注入融化並冷卻至約45℃的營養瓊脂培養基約15ml,放至凝固後,倒置於30~35℃培養箱培養48小時,證明無菌後,取平板3~5個,分別放置工作位置的左中右等處,開蓋暴露30分鐘後,倒置於30~35℃培養箱培養48小時,取出檢查。100級潔淨區平板雜菌數平均不得超過1個菌落,10000級潔淨室平均不得超過3個菌落。如超過限度,應對無菌室進行徹底消毒,直至重複檢查合乎要求為止。

17.在條件較困難的地方,也可以用木製無菌箱代替超淨台。無菌箱結構簡單,便於移動,箱正面開有兩個洞,不操作時用推拉式小門擋住,操作時可以將雙臂伸進去。正面上部裝有玻璃,便於在內部操作,箱內部裝有紫外線燈,從側面小門可以放進去器具和菌種等。

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